Dynamics of the seasonal airborne propagation of Staphylococcus aureus in academic dental clinics

Abstract Objective Staphylococcus aureus strains can be disseminated during dental treatments and occasionally lead to the contamination and infection of patients and dentists, which is an important public health problem. The dynamics of the airborne propagation and the genetic diversity of S. aureus isolated in an academic dental clinic environment were investigated using isoenzyme typing. Material and Methods The isoenzymes of 44 previously reported isolates were obtained from fresh cultures and extracted using glass beads. Nine isoenzymes were investigated using multilocus enzyme electrophoresis (MLEE). The genetic diversity and relationship among the strains (electrophoretic type - ET) were determined using statistics previously described by Nei25 (1972) and the SAHN grouping method (UPGMA algorithm). Results Clonal pattern analyses indicated a high level of genetic polymorphism occurring among the 33 ETs, which were grouped into five taxa. Each taxon presented one or more clusters that were moderately related and that contained two or more identical/highly related isolates, revealing seasonal airborne propagation in these dental clinic environments. Conclusions These data suggest the occurrence of active microevolutionary processes in S. aureus as well as the possibility of environmental propagation during a 14-month time span. Such findings are important to show that multiuser academic dental clinics can retain certain strains that are spreadable to different niches.

Isoenzyme genotyping and phylogenetic analysis of oxacillin-resistance Staphylococcus aureus isolates

Aim: The propagation of S. aureus in hospital and dental environments is considered an important public health problem since resistant strains can cause serious infections in humans. The genetic variability of 99 oxacillin-resistant S. aureus isolates (ORSA) from the dental patients (oral cavity) and environments (air) was studied by isoenzyme genotyping. Methods: S. aureus isolates were studied using isoenzyme markers (alcohol dehydrogenase, sorbitol dehydrogenase, mannitol-1-phosphate dehydrogenase, malate dehydrogenase, glucose dehydrogenase, D-galactose dehydrogenase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, catalase and α/ß-esterase) and genetic (Nei's statistics) and cluster analysis (UPGMA algorithm). Results: A highly frequent polyclonal pattern was observed in this population of ORSA isolates, suggesting various sources of contamination or microbial dispersion. Genetic relationship analysis showed a high degree of polymorphism between the strains, and it revealed three taxa (A, B and C) distantly genetically related (0.653≤dij≤1.432) and fifteen clusters (I to XV) moderately related (0.282≤dij<0.653). These clusters harbored two or more highly related strains (0≤dij<0.282), and the existence of microevolutionary processes in the population of ORSA. Conclusion: This research reinforces the hypothesis of the existence of several sources of contamination and/or dispersal of ORSA of clinical and epidemiologically importance, which could be associated with carriers (patients) and dental environmental (air) (AU)

In vitro SCREENING ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF Bidens pilosa LINNÉ AND Annona crassiflora MART. AGAINST OXACILLIN RESISTANT Staphylococcus aureus (ORSA) FROM THE AERIAL ENVIRONMENT AT THE DENTAL CLINIC / Triagem in vitro da atividade antibacteriana de Bidens pilosa Linné e Annona crassiflora Mart. contra Staphylococcus aureus resistente à oxacilina (ORSA) provenientes do ambiente aéreo na clínica odontológica

Currently multiresistant Staphylococcus aureus is one common cause of infections with high rates of morbidity and mortality worldwide, which directs scientific endeavors in search for novel antimicrobials. In this study, nine extracts from Bidens pilosa (root, stem, flower and leaves) and Annona crassiflora (rind fruit, stem, leaves, seed and pulp) were obtained with ethanol: water (7:3, v/v) and their in vitro antibacterial activity evaluated through both the agar diffusion and broth microdilution methods against 60 Oxacillin Resistant S. aureus (ORSA) strains and against S. aureus ATCC6538. The extracts from B. pilosa and A. crassiflora inhibited the growth of the ORSA isolates in both methods. Leaves of B. pilosa presented mean of the inhibition zone diameters significantly higher than chlorexidine 0.12% against ORSA, and the extracts were more active against S. aureus ATCC (p < 0.05). Parallel, toxicity testing by using MTT method and phytochemical screening were assessed, and three extracts (B. pilosa, root and leaf, and A. crassiflora, seed) did not evidence toxicity. On the other hand, the cytotoxic concentrations (CC50 and CC90) for other extracts ranged from 2.06 to 10.77 mg/mL. The presence of variable alkaloids, flavonoids, tannins and saponins was observed, even though there was a total absence of anthraquinones. Thus, the extracts from the leaves of B. pilosa revealed good anti-ORSA activity and did not exhibit toxicity.

Atualmente Staphylococcus aureus multirresistente é causa comum de infecções com altas taxas de morbidade e mortalidade mundialmente, o que direciona esforços científicos na busca de novos antimicrobianos. Neste estudo, nove extratos de Bidens pilosa (raiz, caule, flor e folhas) e de Annona crassiflora (casca do fruto, caule, folha, semente e polpa) foram obtidos com etanol:água (7:3, v/v) e suas atividades antibacteriana in vitro avaliadas através de difusão em agar e microdiluição em caldo contra 60 cepas de Oxacillin Resistant S. aureus (ORSA) e contra S. aureus ATCC 6538. Os extratos de B. pilosa e A. crassiflora inibiram o crescimento dos isolados ORSA em ambos os métodos. O extrato da folha de B. pilosa apresentou média dos diâmetros dos halos de inibição significativamente maior que a clorexidina 0,12%, contra os isolados ORSA, e os extratos foram mais ativos contra S. aureus ATCC (p < 0,05). Paralelamente, teste de toxicidade pelo método MTT e triagem fitoquímica foram avaliadas, e três extratos (raiz e folha de B. pilosa e semente de A. crassiflora) não apresentaram toxicidade. Por outro lado, as concentrações citotóxicas (CC50 e CC90) para os outros extratos variaram de 2,06 a 10,77 mg/mL. Observou-se variável presença de alcalóides, flavonóides, taninos e saponinas, apesar de total ausência de antraquinonas. Portanto, os extratos das folhas de B. pilosa revelaram boa atividade anti-ORSA e não exibiram toxicidade.

Typing Candida albicans oral isolates from healthy Brazilian schoolchildren using multilocus enzyme electrophoresis reveals two highly polymorphic taxa

The genetic diversity of C. albicans oral isolates from 75 healthy schoolchildren from eight schools located in different geographic areas of Piracicaba city, São Paulo state, Brazil, was established using isoenzymes marker (Multilocus Enzyme Electrophoresis - MLEE) and cluster analysis. Patterns of monoclonal and polyclonal oral colonization by C. albicans within and between groups of schoolchildren were identified. However, significant divergence between the observed and the expected genotypic frequencies (Hardy-Weinberg equilibrium test) was not detected in the geographically adjacent groups, suggesting the hypothesis that populations of healthy schoolchildren do not correspond to the selection factor (differential survival) of strains. Two highly polymorphic and distantly genetically related taxa (A and B) were identified within the total population of yeasts, each contained subgroups (A1, A2, A3, A4, B1 and B2) and clusters of moderately related strains (from I to X), suggesting the existence of strains restricted or not to certain groups of geographically limited, healthy students. However, the coexistence of identical strains in healthy schoolchildren from the same school (geographically related) reinforces the hypothesis of oral transmission, where the sources of propagation could be explored. Furthermore, this could also be used in current and retrospective analyses of C. albicans isolated from immunocompetent and immunocompromised people, in order to detect commensal or potentially pathogenic yeast groups, predominantly in candidiasis, and in the development of strategies to prevent transmission or human propagation.

Efeito do extrato hidroalcoólico de Pyrostegia venusta na mutagênese "in vivo", e avaliação antimicrobiana, e interferência no crescimento e diferenciação celular "in vitro" / Effect of the hydroalcoholic extract of Pyrostegia venusta on "in vivo" mutagenesis and antimicrobial evaluation and interference on the "in vitro" cellular growth and differentiation

Analisa-se a atividade antibacteriana e antifúngica, o crescimento, a diferenciação celular e a ação mutagênica do extrato hidroalcoólico de Pyrostegia venusta (cipó- de-são-joão) em Herpetomonas samuelpessoai. As atividades antimicrobianas foram analisadas por intermédio de métodos de difusão em ágar e macrodiluição. O crescimento e a diferenciação celular de H. samuelpessoai foram realizados em meio quimicamente definido a 28ºC/48 h e analisados quantitativa (câmara de Neubauer) e qualitativamente (formas pró/para/opistomastigota) após coração panótica. A avaliação mutagênica foi realizada pelo teste do micronúcleo em eritroblastos de camundongos Swiss albinus após tratamentos via gavagem (1.000-2.000mg/kg) e decorridos os tempos de 24-48 h. Os resultados mostraram: a) ausência de atividade antimicrobiana para todas as cepas testadas, isto é, B. cereus, B. stearothermophilus, B. subtilis, E. aerogenes, E. coli, K. pneumoniae, M. luteus, P. mirabilis, P. aeruginosa, S. typhimurium, S. aureus, S. epidermidis, S. pyogenes, S. salivarius, C. albicans, C. neoformans e S. cerevisiae, independentemente das concentrações (72,6-145,2 mg/mL); b) ausência de efeitos sobre o crescimento e a diferenciação celular de H. samuelpessoai; c) ausência de efeitos potencialmente clastogênico e/ou aneugênico, independentemente de sexo, tempo e dosagem. Esses dados sugerem que o extrato de Pyrostegia venusta é seguro, podendo ser administrado por via tópica e oral, uma vez que não apresenta potencial carcinogênico/mutagênico. Pelas condições propostas o mesmo não deve ser usado como antimicrobiano.

This study aimed at analyzing the antibacterial and antifungic activity, the cell growth and differentiation in Herpetomonas samuelpessoai and the mutagenic action of the hydroalcoholic extract of Pyrostegia venusta (flame vine; ?cipó-de-são-joão? in Brazil). Antimicrobial activities were determined by agar diffusion and macrodilution techniques. Cellular growth and differentiation of H. samuelpessoai were assessed in a chemically defined medium at 28ºC/48 hours and quantitatively (Neubauer chamber) and qualitatively (pro-/para-/opistomatigote forms) analyzed after panoptic staining. Mutagenesis was evaluated by the micronucleus test in erythroblasts of Swiss albinus mice after treatment by gavage (1000-2000mg/kg) and 24-48 hours. The results showed (i) absence of antimicrobial activity for all the strains tested: B. cereus, B. stearothermophilus, B. subtilis, E. aerogenes, E. coli, K. pneumoniae, M. luteus, P. mirabilis, P. aeruginosa, S. typhimurium S. aureus, S. epidermidis, S. pyogenes, S. salivarius, C. albicans, C. neoformans and S. cerevisiae, independently of the concentrations (72.6-145.2mg/mL; (ii) absence of effects on the cellular growth and differentiation in H. samuelpessoai; and (iii) absence of potentially clastogenic and/or aneugenic effects, independently of sex, time and dose. These data suggest that the Pyrostegia venusta extract can safely be used topically and orally, once they do not exhibit carcinogenic/mutagenic effects, but under the conditions of this experiment it should not be used as antimicrobial agent.

Avaliação da atividade protetora gástrica do extrato de raspa de juá / Assessment of gastric protective of rasp juá extract

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Avaliar a possível atividade gastroprotetora do extrato de raspa de juá (Ziziphus joazeiro) em relação ao estresse, ao uso de indometacina e etanol; verificar a acidez (pH) gástrica por meio da ligadura pilórica (resíduo gástrico puro e com adição de água) e comparar as diferenças dos valores do pH em ambos os modelos. MÉTODO: Foram utilizados 120 ratos (cinco em cada grupo), da espécie Rattus norvegicus albinus, com peso de 150 a 230 g, divididos em 24 grupos distintos, os quais receberam os seguintes tratamentos: extrato de raspa de juá: 250, 500, 1000 e 2000 mg/kg, etanol 0,5 mL; cimetidina (60 mg/kg); indometacina (20 mg/kg); água (1 mL); ligadura de piloro (água; cimetidina e extrato de raspa de juá). Os dados foram analisados pelo programa Grand Pad Prism 5 com aplicação de testes estatísticos. RESULTADOS: O extrato de raspa de juá nas doses de 250, 1000 e 2000 mg/kg sugeriu proteção gástrica no estresse. No modelo de indução de úlcera gástrica por etanol, as doses de 250 e 2000 mg/kg apresentaram proteção gástrica. No grupo do extrato de raspa de juá e indometacina as doses de 250, 1000 e 2000 mg/kg também sugeriram proteção gástrica. Em relação ao valor de pH, o resíduo gástrico, quando verificado puro, é mais ácido que pelo modelo da adição da água, significando que este modelo aumenta o pH, comprovando assim que o modelo do resíduo gástrico puro é mais indicado. CONCLUSÃO: Os dados obtidos no presente estudo mostraram que o extrato de raspa de juá apresentou provável proteção gástrica em determinadas doses.

BACKGROUND AND OBJECTIVES: To evaluate the possible gastroprotective activity of the extract of scrapings juá (Ziziphus joazeiro) by stress, indomethacin and ethanol; check the acidity (pH) through the gastric pylorus ligation (gastric residue pure and with added water) and compare differences in pH values in both models. METHOD: A total of 120 rats (5 in each group), Rattus norvegicus albinus, weighing 150-230 g were divided into 24 distinct groups, which received the following treatments: extract scrapings juá (250, 500 mg, 1000 and 2000 mg/kg), ethanol (0.5 mL), cimetidine (60 mg/kg), indomethacin (20 mg/kg), water (1 mL); ligation of pylorus (water, cimetidine and extract scrapings juá). The data were analyzed by Grand Pad Prism 5 with application of statistical tests. RESULTS: The extract of scrapings juá at doses 250, 1000 and 2000 mg/kg suggested gastric protection in stress. In the model of gastric ulcer induced by ethanol, the dosages of 250 and 2000 mg/kg showed gastric protection. In the group of extract scrapings juá and indomethacin dosages of 250, 1000 and 2000 mg/kg also suggested gastric protection. Regarding the pH, the gastric residue, occurred when pure, is more acidic than the model of the addition of water, meaning that this model increases the pH, thus proving that the model of pure gastric residue is indicated. CONCLUSION: The data obtained in this study show that the extract of scrapings has juá likely gastric protection in certain doses.

Avaliação da atividade protetora gástrica do extrato hidroalcoólico da semente de girassol / Evaluation of the gastroprotective activity of the hydroalcoholic extract of sunflower seeds

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Avaliar quantitativa e qualitativamente a provável proteção gástrica do extrato hidroalcoólico da semente de girassol (EHSG) em relação ao estresse, ao uso de indometacina e etanol; bem como verificar a acidez (pH) gástrica por meio da ligadura pilórica (resíduo gástrico puro e com adição de água) e comparar as diferenças dos valores do pH em ambos os modelos. MÉTODO: Foram estudados 120 ratos (5 em cada grupo) da espécie Rattus norvegicus albinus, com peso de 150-230g, divididos em 24 grupos distintos, os quais receberam os seguintes tratamentos: EHSG: 250 mg/kg, 500 mg/kg, 1000 mg/kg e 2000 mg/kg; etanol 0,5 mL; cimetidina 60 mg/kg; indometacina 20 mg/kg; água 1 mL; ligadura de piloro (água; cimetidina e EHSG). Os dados foram analisados utilizando o programa Grand Pad Prism 5 com aplicação de testes estatísticos considerando o nível de significância de 5%.RESULTADOS: O EHSG nas doses 250 e 1000 mg/kg sugeriu proteção contra as lesões gástricas no estresse. No modelo de indução de úlcera gástrica por etanol, as doses de 250 e 1000 mg/kg apresentaram provável proteção gástrica. No grupo utilizando EHSG 250 mg/kg e indometacina a dose de 250 mg/kg também sugere proteção gástrica. Em relação ao valor de pH, o resíduo gástrico, quando verificado puro, é mais ácido que pelo modelo da adição da água, significando que este último modelo está aumentando o pH, comprovando assim que o modelo do resíduo gástrico puro é mais indicado e prático. CONCLUSÃO: Os dados obtidos no presente estudo mostram que o EHSG apresenta provável proteção gástrica em determinadas doses.(AU)

BACKGROUND AND OBJECTIVES: To evaluate quantitatively and qualitatively the probable gastric protection of hydroalcoholic extract from sunflower seed (EHSG) in relation to stress, the use of indomethacin and ethanol; check the acidity (pH) through the gastric pylorus ligation (gastric residue pure and with added water), and compare differences in pH values in both models. METHOD: A total of 120 rats (5 in each group) of the type Wistar rats weighing 150-230g were divided into 24 distinct groups, which received the following treatments: EHSG: 250 mg/kg, 500 mg/kg, 1000 mg/kg and 2000 mg/kg, 0.5 mL ethanol, cimetidine 60 mg/kg, indomethacin 20 mg/kg, 1 mL water, ligation of pylorus (water, cimetidine and EHSG). The data were analyzed using the Grand Pad Prism 5 with application of statistical tests considering the significance level of 5%.RESULTS: The EHSG at doses 250 and 1000 mg/kg suggested protection against gastric lesions in stress. In the model of gastric ulcer induced by ethanol, the doses of 250 and 1000 mg/kg showed probable gastric protection. Group using EHSG 250 mg/kg and indomethacin dose of 250 mg/kg also suggests gastric protection. Regarding the pH, the gastric residue, occurred when pure, is more acidic than the model of the addition of water, meaning that the latter model is increasing the pH, thus proving that the model of pure gastric residue is more appropriate and more practical. CONCLUSION: The data obtained in this study show that has likely EHSG gastric protection in certain doses.(AU)

Molecular fingerprinting methods for studies involving oral Candida albicans: [review] / Métodos de caracterização molecular para estudos envolvendo Candida albicans de origem bucal: [revisão]

OBJECTIVE: This review was aimed to discuss the literature concerning the fingerprint methods for epidemiological studies of oral-borne Candida albicans. DISCUSSION: Interest in obtaining a better understanding of the pathogenesis, epidemiology, genetics and evolution of Candida albicans has led to the development of innumerable investigations. These studies have employed fingerprinting systems, such as multilocus enzyme electrophoresis, electrophoretic karyotyping, randomly amplified polymorphic DNA, and restriction length fragment polymorphism, with and without hybridization. The efficacy of these systems has been examined at different levels of discrimination. A validation strategy has been delineated which compares two or more unrelated methods. Moreover, the different fingerprinting patterns produced could be registered in database programs and submitted to comparison with parameters of the host and characteristics of the pathogen. These procedures permit urrent and retrospective comparison of a selection of clinical and epidemiologically important strains, which could show one or several characteristics of the host or pathogen. Additionally, the sum of this growing amount of information could contribute even more to the understanding of the dynamics of infectious organisms in human populations, the complex relationship between commensalism and infection, and genetic and evolutionary mechanisms. CONCLUSIONS: Multiple molecular systems are available for studies involving C. albicans. This growing amount of information contributes to the understanding of the dynamics of this fungus in human populations.

OBJETIVO: Esta revisão discute as informações existentes acerca dos métodos de caracterização para estudos epidemiológicos envolvendo Candida albicans de origem bucal. DISCUSSÃO: O interesse no melhor entendimento da patogênese, epidemiologia, genética e evolução de C. albicans tem levado os pesquisadores à condução de inúmeras investigações. Esses estudos empregam sistemas de caracterização molecular como eletroforese de enzimas multilocus, cariotipagem por eletroforese, amplificação do DNA polimórfico ao acaso e polimorfismo dos fragmentos de restrição com e sem hidridização. A eficácia desses sistemas tem sido avaliada nos seus diferentes níveis de discriminação. Uma estratégia de validação foi delineada, a qual compara dois ou mais métodos não relacionados. Ainda, os diferentes padrões de caracterização molecular produzem dados que podem ser avaliados por programas computacionais e permite a comparação comparâmetros do hospedeiro e características do patógeno. Tais procedimentos permitem comparações correntes e retrospectivas de cepas clínicas e epidemiologicamente importantes, que podem mostrar uma ou mais características do hospedeiro ou do patógeno. A somatória do montante de informação pode contribuir para o entendimento da dinâmica dos organismos infecciosos em populações humanas, as relações complexas entre comensalismo e infecção, e mecanismos genéticos e evolutivos. CONCLUSÕES: Vários sistemas de caracterização molecular estão disponíveis para estudos envolvendo C. albicans. Este aumento de informação contribui na compreensão da dinâmica deste fungo em populações humanas.

Diferentes métodos fenotípicos para isolamento e identificação de espécies de Candida / Different phenotypic methods for isolation and identification of Candida species

C. albicans é o mais frequente agente responsável pela candidíase e está também associada a doençasimunossupressoras como, por exemplo, diabetes. Entretanto, outras espécies não-albicans como C.dubliniensis inicialmente associada com candidíase da orofaringe de pacientes infectados pelo vírus HIV,onde ainda é mais prevalente, tem sido reconhecida como causa de infecção em pacientes com câncer,com fibrose cística e pacientes com diversas patologias e diferentes graus de imunocomprometimento.Utilizando-se métodos fenotípicos para identificação de Candida spp. é possível discriminar rotineiramenteisolados orais em laboratórios de microbiologia. Um dos problemas que interferem na realização de identificaçãodas espécies do gênero Candida em estudos epidemiológicos mais amplos é a dificuldade da rápidaidentificação, a partir de meios de triagem de baixo custo. Dessa forma, alguns métodos fenotípicos sãoapresentados com o objetivo de contribuir na busca de testes alternativos que possam com segurança, seremaplicados às rotinas de laboratórios.

C. albicans is the frequent agent for the oral candidosis and it is also associated to immunosuppressivediseases as, for example, diabetes. However, other non-albicans species such as C. dubliniensis initiallyassociated with candidosis in orofaringe patients infected by the virus HIV, where is still more prevalent,it has been recognized as infection cause in patients with cancer, cystic fibrosis and patients with severalpathologies. Phenotypics methods for Candida spp. are easy-to-use procedures for routine discriminationof oral isolates in the clinical microbiology laboratory. One of the problems that interfere in the identificationaccomplishment of the species of Candida in more wide epidemic studies is the difficulty of the fast identification,starting from screen methods of low cost. In that way, some phenotypics methods are presented withthe objective of contributing in the search of alternative tests to be applied as routine in laboratories.

Genetic polymorphism of Streptococcus mutans strains associated with incomplete caries removal

Aim: Despite the antibacterial properties of dental materials, the survival of residual bacteria under restorations has been demonstrated after incomplete caries removal. The aim of this study was to evaluate the genetic polymorphism of Streptococcus mutans strains isolated from deep dentinal lesions before and three months after incomplete caries removal. Methods: Samples of carious dentin were collected from 33 primary and/or permanent molars before and after indirect pulp treatment and processed for microbiological isolation of mutans streptococci (MS). After three months of the dental treatment, positive cultures for MS were detected in only ten of these teeth. DNA of MS isolates were obtained and subjected to polymerase chain reaction (PCR) for identification of S mutans. The arbitrary primed-PCR method (primer OPA-13) was used to detect the genetic polymorphism of S. mutans strains. Results: Identical or highly related S. mutans genotypes were observed in each tooth, regardless of the collect. Considering each tooth separately, a maximum of nine genotypic patterns were found in each tooth from all the collects. In addition, at least one genotypic pattern was repeated in the three collects. Genetic diversity was observed among the S. mutans isolates, obtained from different teeth after three months of the dental treatment. Conclusions: The persistence of identical genotypic patterns and the genetic similarity among the isolates, from the same tooth in distinct collects, showed the resistance of some S. mutans strains after incomplete caries removal treatment.

Mutilocus enzyme electrophoresis typing of candida albicans populations isolated from healthy children according to socioeconomic background

O objetivo desta pesquisa foi avaliar o grau de diversidade genética dentro e entre populações de C. albicans isoladas da cavidade bucal de crianças saudáveis brasileiras classificadas em cinco categorias socioeconômicas (A até E), através da análise de Eletroforese de Enzimas Multilocos (MLEE). Alta diversidade genética foi observada em todas as populações, as quais mostraram predominância de alguns subtipos de C. albicans (Tipos Eletroforéticos – Ets). Contudo, nenhuma correlação foi observada entre ET-específico e população-específica de crianças. A existência de um ou mais grupos de ET altamente relacionados foi mostrada pela análise de agrupamento, o que sugere a existência de rotas de propagação direta e indireta de C. albicans entre crianças saudáveis. Alterações microevolucionárias foram observadas em algumas populações de C. albicans isoladas de crianças que tiveram a mesma, ou muito próxima, condição socioeconômica. Além disso, baixa transição de subtipos de C. albicans podem estar ocorrendo entre certas populações de crianças provenientes de alta e média/alta, ou alta e média/baixa, ou média/alta e média/baixa, categorias socioeconômicas, o que pode ser esclarecido pelas próprias características socioeconômica e cultural.

Staphylococcus aureus ampicillin-resistant from the odontological clinic environment

Foi avaliada a prevalência de Staphylococcus spp. e S. aureus no ambiente clínico odontológico, a produção de ß-lactamase e a susceptibilidade antibacteriana aos principais antibióticos utilizados na prática clínica. Durante 12 meses de coleta de amostras foram isolados 9775 UFC no meio de cultura AMS, demonstrando uma elevada quantidade de Staphylococcus spp. no ambiente clínico, provavelmente em decorrência da propagação de aerossóis. Um total de 3149 colônias (32,2%) foi sugestivo de estafilococos patogênicos. Coloração de Gram, teste de catalase, crescimento de colônias-malva sobre meio cromogênico e teste de coagulase confirmaram a identidade de 44 (0,45%) isolados de S. aureus. Destes, 35 isolados (79,5%) mostraram produção de ß-lactamase através de discos de CefinaseTM e resistência a ampicilina, eritromicina (7 isolados) e tetraciclina (1 isolado), sugerindo a existência de isolados multirresistentes. A avaliação do MIC de oxacilina através dos ensaios de Etest® mostrou padrões de susceptibilidade o que sugere a inexistência do gene mecA gene no DNA cromossômico. Estes resultados apontam para a necessidade de um maior conhecimento sobre os meios de contaminação e propagação deste microrganismo dentro da clínica odontológica.

SDS-Page and numerical analysis of Candida albicans from human oral cavity and other anatomical sites

O objetivo da presente pesquisa foi analisar os graus de polimorfismos protéicos entre isolados de C. albicans provenientes de diversos sítios anatômicos de quarenta e dois pacientes clínicos, através do emprego da eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e análise numérica, a fim de se identificar subespécies e suas similaridades nos diversos nichos infecciosos. Culturas celulares foram desenvolvidas em meio YEPD, coletadas por centrifugação e lavadas com solução salina gelada. As proteínas celulares totais, foram extraídas por rompimento celular, usando pérolas de vidro e submetidas à técnica de SDS-PAGE. Após a eletroforese, as bandas de proteínas foram coradas com coomassie-blue e analisadas pelo conjunto de programas estatístico NTSYS-pc versão 1,70. Matrizes de similaridade e dendrogramas foram gerados pela aplicação do coeficiente de similaridade simple-matching e do algoritmo UPGMA, respectivamente. Os resultados obtidos revelaram vários subtipos de C. albicans e seus graus de similaridade (80 per center a 100 per center). Tais dados permitiram demonstrar que, certos pacientes podem estar infectados com dois ou mais subtipos de C. albicans em determinados sítios anatômicos (i.e. apenas na cavidade oral de pacientes imunocomprometidos, sangue ou secreção traqueal), ou ainda, dois ou mais pacientes podem estar infectados em sítios anatômicos idênticos (i.e. apenas em lavagem brônquica, urina, cavidade oral, secreção traqueal, secreção vaginal ou saliva saudável) com um mesmo subtipo de C. albicans. No entanto, dois ou mais pacientes também podem apresentar infecções em sítios correspondentes (i.e. apenas na cavidade oral de pacientes imunocomprometidos, sangue, secreção orofaríngea, cavidade oral, secreção traqueal, secreção vaginal e saliva saudável) por diferentes subtipos de C. albicans. Além disso, dois ou mais pacientes também podem estar infectados com subtipos idênticos ou não de C. albicans em diferentes sítios anatômicos (i.e.1. idênticos subtipos na secreção vaginal, secreção traqueal e urina; secreção abdominal e escarro; drenagem e cavidade oral; cateter e saliva saudável - i.e.2. diferentes subtipos em lavagem brônquica, secreção orofaríngea, secreção pulmonar, cavidade oral de pacientes imunocomprometidos e sangue)...

Electrophoretic protein patterns and numerical analysis of Candida albicans from the oral cavities of healthy children

O objetivo da presente pesquisa foi avaliar os graus de polimorfismos protéicos entre setenta e cinco linhagens de C. albicans isoladas da cavidade oral de crianças saudáveis provenientes de cinco categorias socioeconômicas e oito escolas (particulares e públicas) do município de Piracicaba, Estado de São Paulo, a fim de identificar subespécies de C. albicans e suas similaridades em grupos de populações infantis e estabelecer suas possíveis rotas de disseminação. Culturas celulares foram desenvolvidas em meio YEPD, coletadas por centrifugação e lavadas com solução salina gelada. As proteínas celulares totais foram extraídas por rompimento celular usando pérolas de vidro e submetidas à técnica de SDS-PAGE. Após a eletroforese, as bandas de proteínas foram coradas com Coomassie-blue e analisadas pelo conjunto de programas estatísticos NTSYS-pc versão 1.70. Matriz de similaridade e dendrograma foram gerados, pela aplicação do coeficiente de similaridade de Dice e do algoritmo UPGMA, respectivamente, os quais permitiram avaliar os graus de polimorfismo ou similaridade intra-específico, baseados nos padrões eletroforéticos de proteínas totais de isolados orais de C. albicans. Um total de 13 principais fenons (grupos) foi analisado de acordo com suas características homogêneas (categoria socioeconômica e/ou escola idênticas) e heterogêneas (categorias socioeconômicas e/ou escolas diferentes). Com relação ao aspecto epidemiológico socioeconômico, as composições dos grupos mostraram alta similaridade (0.788 < SD < 1.0) entre algumas linhagens de C. albicans isoladas de crianças saudáveis independentemente de suas camadas socioeconômicas (alta, média e baixa). Isolados de alta similaridade não foram encontrados nas cavidades orais de crianças saudáveis pertencentes às camadas sociais A e D, B e C, ou C e E. Isto pode ser explicado pela ausência de uma rota de disseminação entre estas crianças. Geograficamente, algumas crianças saudáveis entre escolas idênticas e diferentes (particulares e públicas) também são portadoras de linhagens semelhantes, mas tal similaridade não foi encontrada entre outros de determinadas escolas. Esses dados podem refletir uma rota de disseminação restrita destes microrganismos em alguns grupos de escolares saudáveis, a qual pode ser dependente da categoria socioeconômica ou local geográfico de cada criança. Em contraste à alta similaridade, a baixa similaridade ou alto grau de polimorfismo dos perfis protéicos foi demonstrado...

Candida spp.biotypes in the oral cavity of school children from different socioeconomic categories in Piracicaba - SP, Brazil / Biotipos de candida spp.na cavidade oral de escolares de diferentes categorias socioeconômicas de Piracicaba - SP, Brasil

Duzentos e trinta e nove crianças brasileiras foram estudadas, distribuídas em cinco categorias socioeconômicas distintas (A a E). As amostras de saliva foram analisadas avaliando-se o fluxo salivar, pH, capacidade tampäo e parâmetros microbianos. Os resultados mostraram Candida em 47,3 por cento da amostra total. A espécie mais encontrada foi C. albicans em todas as categorias socioeconômicas seguidas por C. tropicalis, C. krusei e C. parapsilosis. A saliva e os parâmetros de investigaçäo clínicos como a proporçäo de secreçäo, capacidade tampäo e CFU/ml de Candida näo mostraram nenhuma correlaçäo estatística entre estes parâmetros. A freqüência de Candida näo diferiu substancialmente entre os grupos; no entanto elas foram mais acentuadas entre as categorias B e C. Entre todas as espécies, C. albicans foi a mais prevalente. Somente 5 por cento das amostras mostraram mais de uma espécie e revelaram a presença de C. albicans associada com C. tropicalis, C. Parapsilosis ou C. krusei. Foi possível detectar uma correlaçäo significante entre os índices de cárie e as categorias socioeconômicas. As categorias A e E mostraram índices de cárie aumentados; no entanto, a amostra da populaçäo foi considerada de risco de cárie baixo. Näo havia nenhuma correlaçäo positiva entre Candida e risco de cárie